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人腎透明細胞癌細胞,786-O*

簡要描述:人腎透明細胞癌細胞,786-O*
該細胞源自一位原發(fā)性腎透明細胞癌患者。該細胞有微絨毛和橋粒,能在軟瓊脂上生長。此細胞生成一種PTH(甲狀旁腺素)樣的多肽,與乳癌和肺癌中生成的肽相似,其N端序列與PTH相似,具有PTH樣活性,分子量為6000D。

  • 產  地:上海
  • 廠商性質:經銷商
  • 更新時間:2024-08-25
  • 訪  問  量:911

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人腎透明細胞癌細胞,786-O*
該細胞源自一位原發(fā)性腎透明細胞癌患者。該細胞有微絨毛和橋粒,能在軟瓊脂上生長。此細胞生成一種PTH(甲狀旁腺素)樣的多肽,與乳癌和肺癌中生成的肽相似,其N端序列與PTH相似,具有PTH樣活性,分子量為6000D。。

 動物種別:人

性別:男
組織來源:腎;腎細胞腺癌
形態(tài):上皮細胞
 
培養(yǎng)條件

培養(yǎng)基:RPMI-1640+10%FBS+1%PS

溫度:37℃

氣相:95%空氣,5%二氧化碳

    使用權限 A類 

    細胞用途僅供科研使用。

    方     式: 詳詢經理

    人腎透明細胞癌細胞,786-O*

    使用權限 A類注意事項:
    細胞培養(yǎng)步驟
    一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
    1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質胎牛血清,10%。
    2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
    3)凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。
    二.細胞處理:
    1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
    2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
    對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
    1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
    2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
    3.按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
    4.將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
    對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
    方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
    方法二:可選擇半數換液方式,棄去半數培養(yǎng)基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
    3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
     

     
    注意事項:
    1. 收到細胞后,若發(fā)現干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染,請立即與我們聯系。
    2. 所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物安全臺內操作,并請注意防護,所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。
     
     

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